疾患関連糖鎖・タンパク質の統合的機能解析

■研究代表者プロフィール

林　紀夫　Norio Hayashi (MD.,PhD)
大阪大学大学院医学系研究科内科学講座（消化器内科学）・教授、大阪大学医学部附属病院・病院長

1972年大阪大学医学部卒業。79年米国テキサス大学医学部生化学研究室研究員、81年医学博士、大阪大学医学部第一内科助手、87年同講師、97年同助教授を経て、1998年より現職。2007年大阪大学医学部附属病院・院長。専門は消化器内科学、肝臓病学。主な著書に「標準消化器病学」「C型肝炎」など。日本肝臓学会織田賞受賞。

研究代表者：	林　紀夫（消化器内科学・教授）
研究分担者：	竹原徹郎（消化器内科学・准教授）考藤達哉（樹状細胞制御治療学・客員准教授）巽　智秀（未来医療センター・助教）
研究協力者：	平松直樹（消化器内科学・助教）大川和良（樹状細胞制御治療学・客員助教）

　ウイルス肝炎は全世界的に多くのウイルスキャリアーが存在し、ウイルス肝炎を基礎疾患とした肝細胞癌は増加傾向にあり、その病態の解析及び治療法の開発は急務である。我々の研究室では、ウイルス肝炎、中でもC型肝炎ウイルスによる肝炎発症機構の解明を中心に研究を行っている。樹状細胞(DC)は、生体において最も強力な抗原提示細胞であり、ウイルスに対する免疫反応の賦活や調節を行っている。DC上にはNK細胞活性化に重要な役割を果たす糖タンパク分子MICA/Bが発現している。我々はC型慢性肝炎患者DCでは、MICA/B分子の発現が健常人に比較して有意に抑制されていることを明らかにし、現在このメカニズムに関して検討中である(1)。またC型肝炎ウイルスのエンベロープタンパク(E1、E2)を被ったシュード(偽)タイプ水疱性口内炎ウイルス(VSV)を用いた検討で、C型肝炎ウイルスがDC1(myeloid DC)に選択的に感染し、このメカニズムにレクチンを含んだ分子が、重要な役割を果たしていることを明らかにした(2)。DCにはmyeloid DC　(MDC)とplasmacytoid DC(PDC)のsubsetがあるが、C型慢性肝炎患者ではMDC、PDCともに数的機能的に抑制されており、MDCによるCD4陽性T細胞のTh1への誘導は抑制、PDCによるIL-10産生細胞誘導は亢進することを明らかにした(3)。今後ウイルス肝炎特にC型肝炎発症機構を免疫学的・分子生物学的に解析し、新たな治療法の開発を目指している。一方C型慢性肝炎では多くの患者で肝細胞癌が発生するが、より強力な治療法の開発は急務である。我々は、肝細胞癌上のMICA/B分子を介したNK細胞の細胞障害活性のメカニズムを明らかにした。さらに肝細胞癌に対するDCを用いた癌免疫療法の基礎的検討も行い、Th1系のサイトカインであるIL-12やIL-18をDCに遺伝子導入して、これを腫瘍内に直接注入することで、強力な腫瘍免疫の誘導が可能であることを明らかにした。今後さらなる基礎的検討の上、DCによる癌免疫療法の臨床応用を目指している。

樹状細胞は免疫反応の中心に位置し、ウイルス肝炎発症に重要な役割を果たしている。樹状細胞上には、様々な糖タンパク・糖鎖が発現しているが、我々はウイルス肝炎におけるこれら分子の病態解析を行い、次世代の治療法の開発を目指している。

1)	Tatsumi T, Takehara T, Yamaguchi S, Sasakawa A, Sakamori R, Ohkawa K, Kohga K, Uemura A, and Hayashi N. Intrahepatic delivery of α-galatosylceramide pulsed dendritic cells suppresses liver tumor. Hepatololgy, 45, 22-30, 2007.
2)	Miyagi T, Takehara T, Tatsumi T, Suzuki T, Jinushi M, Kanazawa Y, Hiramatsu N, Kanto T, Tsuji S, and Hayashi N. Concanavalin A injection activates intrahepatic innate immune cells to provoke an anti-tumor effect in murine liver. Hepatology, 40, 1190-1196, 2004.
3)	Jinushi M, Takehara T, Tatsumi T, Kanto T, Miyagi T, Suzuki T, Kanazawa Y, Hiramatsu N, and Hayashi N. Negative regulation of NK cell activity by inhibitory receptor CD94/NKG2A leads to altered NK cell-induced modulation of dendritic cell functions in chronic hepatitis C virus infection. J. Immunol., 173, 6072-6081, 2004.
4)	Ohkawa K, Ishida H, Nakanishi F, Hosui A, Ueda K, Takehara T, Hori M, and Hayashi N. Hepatitis C virus core functions as a cyclin-dependent kinase-activating kinase and impairs cell cycle progression. J. Biol. Chem., 279, 11719-11726, 2004.
5)	Takehara T, Tatsumi T, Suzuki T, Bucker EB III, Henninghausen L, Jinushi M, Miyagi T, Kanazawa Y, Hayashi N. Hepatocyte-specific disruption of Bcl-xL leads to continuous hepatocyte apoptosis and liver fibrotic responses. Gastroenterology, 127, 1189-1197, 2004.